5. ВЫВОДЫ

 

1. 1. Разработаны колориметрические ферментные тесты на основе препаратов БуХЭ из сыворотки крови лошади и микробиальной КЭ, стабилизированных путем включения в твердые растворы на основе N-фталилхитазана, полиглюкина или b-декстрана, предназначенные для определения ингибиторов ферментов в водных системах. Пределы обнаружения фосфорорганических пестицидов   составляют nЧ(10-8-10-9) моль/л, что позволяет детектировать присутствие загрязнителей в объектах окружающей среды на уровне ПДК. Аналитические характеристики определения обратимых и необратимых ингибиторов ферментов зависят от природы стабилизатора, субстрата и буферного раствора.

2. Электролиз в присутствии хлорида натрия позволяет повысить чувствительность определения тионовых фосфорорганических соединений и аминофосфонатов. Показано, что механизм "активации" состоит в окислении тиофосфатов и фосфонатов электрохимически генерированным хлором до более активных ингибиторов. 

3. Присутствие обратимых ингибиторов (фториды, ионы тяжелых металлов) снижает чувствительность определения пестицидов. Подбор рабочих условий определения (состав буферных растворов, добавки N-фталилхитазана) позволяют подавить защитное действие эффекторов.

4.  Установлено, что гидразоны диалкилдитиофосфатов и a-аминофосфонаты являются слабыми ингибиторами ферментов вследствие взаимного связывания аминогруппы и фосфата (фосфоната).  Электролиз, разрушающего связывание, приводит к необратимому ингибирующему действию с максимумом при рН 3.5-4.0. Применение КЭ, устойчивой к действию ионных эффекторов, понижает пределы обнаружения до nЧ(10-7-10-8) моль/л. 

5. Разработана упрощенная методика экспресс-определения  остаточных  количеств фосфорорганических пестицидов в зерне и почвах без удаления органического растворителя из экстракта с пределом обнаружения пестицидов  nЧ(10-1-10-2) мг/кг. Изучено влияние компонентов растительной матрицы на аналитические характеристики определения пестицидов. 

6. Показана возможность использования холинэстеразного теста для оценки общей загрязненности осадков сточных вод тяжелыми металлами. Наблюдаемая активация БуХЭ обусловлена изменением буферных свойств и кислотности вытяжек в процессе экстракции. Ацетоновые вытяжки из этих осадков проявляют обратимое ингибирующее действие, подавляемое электрохимической обработкой.

Основное содержание работы изложено в следующих публикациях:

1. Никольская Е.Б., Евтюгин Г.А., Искандеров Р.Р., Герасимова (Стойкова) Е.Е., Латыпова В.З. Определение присутствия фосфорорганических пестицидов в растительных продуктах с помощью сенсорных устройств на основе холинэстеразы. / Тез. докл. Межд. конф. "Сенсор-Техно-93. Сенсорные системы и компоненты." С.-Петербург, 1993.-С.278.

2. Евтюгин Г.А., Стойкова Е.Е. Повышение чувствительности ферментативного определения фосфорорганических пестицидов путем электрохимической активации пробы. / Тез. докл. IV конф. по электрохимическим методам анализа "ЭМА-94" Москва, 1994.-С.191.

3. Evtugyn G.A., Stoikova E.E., Budnikov H.C., Nikolskaya E.B. Determenation of P,N-containing organiс compounds based on carboxylesterase from mold fungi. /5th Int. Symp.of Kinetics in Analytical Chemistry "KAC-95". Moscow,1995. P.45.

4. Евтюгин Г.А., Стойкова Е.Е., Искандеров Р.Р., Никольская Е.Б., Будников Г.К. Электрохимическая пробоподготовка в ферментативном определении ингибиторов холинэстеразы. //Журн.анал. химии. -1997.-Т.52.- ?1.-С.6-10.

5. Евтюгин Г.А., Стойкова Е.Е., Никольская Е.Б., Будников Г.К. Влияние ионов металлов на колориметрическое определение необратимых ингибиторов холинэстеразы. // Журн. анал. химии.- 1997.-Т.52.- ?2.-С.188-192.

6. Будников Г.К., Евтюгин Г.А., Никольская Е.Б., Стойкова Е.Е. Влияние макрокомпонентов на контроль следовых количеств фосфорорганических токсикантов в объектах окружающей среды. / Тез. докл. Всерос. конф. с международным участием "Химическое разоружение-96. Экология и технология". Ижевск, 1996.- С.20-21.

7. Стойкова Е.Е., Стойков И.И. Ферментативное определение гидразонов диалкилдитиофосфорных кислот и a-аминофосфонатов в водной и водноорганической средах. / Тез. докл. Молодеж. симп. по химии фосфорорганических соединений "Петербургские встречи-97". С.-Петербург, 1997.- С.20.

8. G.A.Evtugyn, E.P.Rizaeva, E.E.Stoikova, V.Z.Latipova, H.C.Budnikov The application of inhibitor biosensors in local programmes of environmentral monitoring./ Proc. of NATO Advanced Research Workshop on Biosensors for the Direct Monitoring of Environmental Pollutants in Field. Smolenice, Slovakia, May 3-9, 1997.- P.49.

9. G.A.Evtugyn, E.P.Rizaeva, E.E.Stoikova, V.Z.Latipova, H.C.Budnikov The application of cholinesterase biosensor for preliminary screening of the toxicity of waste waters.// Electroanalysis.- 1997.- V.9.- ? 14.-  P.1124-1128.

| Влияние эффекторов | В начало |