Примером сочетания нескольких ферментов в конструкции биосенсора может служить биферментный электрод, включающий холиноксидазу (ChO) и холинэстеразу (AChE) [17]. Определяемое вещество - ацетилхолин - гидролизуется до холина в присутствии AChE, образующийся холин биоэлектрохимически окисляется в присутствии ChO до бетаина (рис.9). Медиатором последнего процесса служит 2,6-дихлорфенолиндофенол (2). Ток, генерируемые на биокаталитическом электроде, пропорционален концентрации первичного субстрата ацетилхолина.

 

Рисунок 9: (A) Схема формирования сигнала и  (B) Зависимость электрокаталитического тока от концентрации ацетилхолина. Рабочий потенциал 0.3 V (отн. нис.к.э.) медиатор - 2,6-дихлорфенол инодфенол (2) (40 mM)

 

Трехмерная компьютерная модель ацетилхолинэстеразы. Сдвоенные голубые ленты - аминокислотные последовательности, структура из зеленых и красных сфер в центре - ацетилхолин, фиолетовые циклы вокруг - остатки аминоксилот активного центра, серые сферы - молекулы воды.

 

Окисление холина происходит в две ступени. Эта реакция, катализируемая холиноксидазой, является частью катаболизма глицина. С химической точки зрения, особый интерес представляет механизм расщепления связи углерод-водород, характеризующегося значительной энергией активации

 

Глава 2

Литература к главе 2